（フローサイトメトリー、FCM）は、染色細胞マーカーの蛍光強度を測定するセル分析器です。これは、単一のセルの分析と並べ替えに基づいて開発されたハイテク技術です。サイズ、内部構造、DNA、RNA、タンパク質、抗原、および細胞のその他の物理的または化学的特性を迅速に測定および分類することができ、これらの分類の収集に基づくことができます。
フローサイトメーターは、主に次の5つの部分で構成されています。
1フローチャンバーおよび流体システム
2レーザー光源とビーム型システム
3光学システム
4つの電子機器、ストレージ、ディスプレイ、分析システム
5セル選別システム
その中で、レーザー光源とビーム形成システムのレーザー励起は、フローサイトメトリーの蛍光信号の主な測定です。励起光の強度と曝露時間は、蛍光信号の強度に関連しています。レーザーは、単一波長、高強度、および高安定性の照明を提供できる一貫した光源です。これらの要件を満たすのは理想的な励起光源です。
レーザー源とフローチャンバーの間には、2つの円筒形レンズがあります。これらのレンズは、レーザー源から放出された円形の断面を備えたレーザービームを焦点を合わせて、より小さな断面（22μm×66μm）を備えた楕円形のビームに焦点を合わせます。この楕円形のビーム内のレーザーエネルギーは、正規分布に従って分布しており、レーザー検出領域を通過する細胞の一貫した照明強度を保証します。一方、光学システムは、複数のレンズ、ピンホール、フィルターのセットで構成されており、フローチャンバーの上流と下流の2つのグループにほぼ分けることができます。
フローチャンバーの前の光学システムは、レンズとピンホールで構成されています。レンズとピンホール（通常は2つのレンズとピンホール）の主な機能は、レーザー源から放出される円形の断面でレーザービームをより小さな断面を備えた楕円形のビームに焦点を合わせることです。これにより、正規分布に応じてレーザーエネルギーが分布し、レーザー検出エリア全体の細胞の一貫した照明強度を確保し、漂流光からの干渉を最小限に抑えます。
フィルターには3つの主要なタイプがあります。
1：ロングパスフィルター（LPF） - 特定の値よりも高い波長で光のみを通過させます。
2：ショートパスフィルター（SPF） - 特定の値を下回る波長の光のみを通過させます。
3：バンドパスフィルター（BPF） - 特定の波長範囲の光のみが通過できます。
フィルターのさまざまな組み合わせにより、さまざまな波長での蛍光信号を個々の光電子充填剤チューブ（PMT）に向けることができます。たとえば、PMTの前の緑色蛍光（FITC）を検出するためのフィルターは、LPF550およびBPF525です。 PMTの前のオレンジレッド蛍光（PE）を検出するために使用されるフィルターは、LPF600およびBPF575です。 PMTの前の赤蛍光（CY5）を検出するためのフィルターは、LPF650およびBPF675です。
フローサイトメトリーは、主にセルの並べ替えに使用されます。コンピューターテクノロジーの進歩、免疫学の開発、モノクローナル抗体技術の発明により、生物学、医学、薬局、その他の分野におけるその応用がますます広まっています。これらの用途には、細胞ダイナミクス分析、細胞アポトーシス、細胞タイピング、腫瘍診断、薬物有効性分析などが含まれます。
投稿時間：2023年9月21日
